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　　重癥肌無力（myastheniagravis，MG）是一種T細胞依賴的乙酰膽堿受體抗體（AChR-Ab）介導的自身免疫性神經(jīng)肌肉接頭處的疾病。MG的基本病理機制是AChR-Ab介導的神經(jīng)肌接頭終板突觸后膜上乙酰膽堿受體（AChR）數(shù)量的減少。乙酰膽堿受體抗體是MG主要的自身抗體，由自身反應性T淋巴細胞激活體內(nèi)的B淋巴細胞產(chǎn)生。FcyRIIB是細胞表面免疫球蛋白IgG的Fc段受體之一，是一個能與IgG的Fc段低親和力結合的抑制性受體，也是表達于B淋巴細胞表面的免疫球蛋白受體，在調(diào)節(jié)免疫反應中具有重要作用。

　　重癥肌無力抗體的測定步驟如下：

　　1.抗原包被：用PH值9.6的碳酸鹽/碳酸氫鹽緩沖液將純化的AChR以0.5ug/ml的濃度進行稀釋，按每孔0.1ml小心加入酶標板各孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。然后用封板膜封好反應孔，放在4℃冰箱中12小時過夜。

　　2.洗滌：倒盡板孔中液體，吸干孔內(nèi)殘余反應液，空干，加滿洗滌液晃動2min，倒去，反復4次，將反應板倒置在吸水紙上，拍干。

　　3.封閉：在各反應孔中加滿含2%牛血清蛋白的PH值7.4/0.01M的PBS，室溫下孵育30min。

　　4.加血清：按上述方法再洗滌4次后，在各反應孔中加入用0.01M，PH值為7.4的PBS-Tween20稀釋100倍的MG患者的血清0.1ml，每份標本做兩孔檢測，留2孔為空白對照。用封板膜封好各反應孔，37℃水浴90min。

　　5.加HRP-羊抗人IgG抗體：按上述方法洗滌4次后，在各反應孔中加入用0.01M，PH值為7.4的PBS-Tween20稀釋1000倍的HRP-羊抗人IgG抗體0.1ml，用封板膜封好各反應孔，37℃水浴90min。

　　6.加底物：按上述方法洗滌4次，在各反應孔中加入顯色劑A液和顯色劑B液各70ul，用封板膜封好各反應孔。避光顯色10min。

　　7.加終止液：在各反應孔中加入終止液50ul，終止顯色反應。

　　8.結果判讀：根據(jù)有無顯色反應判定結果的陰、陽性。

　　9.終止顯色反應30min內(nèi)在酶標儀上讀取450mm/630mm的OD值。將MG患者的OD值減去空白對照的OD值即為結果，每份血清的結果為兩孔平均值。該結果與血清中抗AChR-lgG水平為半對數(shù)關系，OD值越高則血清中抗AChR-IgG的水平越高。