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大小鼠微透析探針的使用要求與存放規范

日期:2025-08-25瀏覽:126次

  微透析技術作為一種活體取樣方法,在大小鼠實驗研究中廣泛應用。其核心部件——大小鼠微透析探針的正確使用和妥善保存直接影響實驗數據的質量和動物福利。以下是詳細的操作指南:
  一、大小鼠微透析探針實驗過程中的動態管理
  1. 實時狀態監控
  配備在線紫外檢測器的系統應每小時記錄一次吸光度圖譜,及時發現蛋白質吸附導致的信號漂移。單純依靠手動收集樣本時,每管樣品開始收集前需丟棄前兩滴液體以消除死體積影響。
  2. 抗干擾措施實施
  為減少動物自主活動產生的機械擾動,建議采用柔性固定臂配合重量平衡裝置。對于清醒動物實驗,可通過訓練建立操作性條件反射實現主動配合,降低應激反應帶來的生理指標波動。
  3. 樣本時效性管控
  收集后的透析液應立即置于冰上暫存,并在2小時內完成冷凍保存。若需長時間儲存,建議添加蛋白酶抑制劑并分裝于預硅化的EP管中,避免反復凍融破壞待測物穩定性。
  二、大小鼠微透析探針回收處理與清洗再生
  1. 安全取出流程
  實驗結束后先降低灌流速度至0.5μL/min維持10分鐘,使周圍組織逐漸適應無刺激狀態。輕柔旋轉拔出探針,立即用生理鹽水沖洗外部可見血跡,隨后進入標準化清洗程序。
  2. 分級清洗方案
 ?、?基礎清洗:依次用去離子水、75%乙醇超聲震蕩各15分鐘;② 深度脫脂:丙酮浸泡過夜后氮氣吹干;③ 滅菌處理:高壓蒸汽滅菌(121℃/20min)或環氧乙烷氣體熏蒸。不同材質探針對消毒方式有特定要求,金屬型可選擇高溫滅菌而纖維束型僅限低溫法。
  3. 性能驗證標準
  再生后的探針需通過跨膜通量測試方可重新投入使用。常用方法包括熒光素鈉通透性實驗和反滲試驗,要求恢復率達到初始值的90%以上才算合格。不合格者應及時淘汰并記錄報廢原因。
  三、大小鼠微透析探針長期存放維護策略
  1. 干燥保存環境
  清洗干燥后的探針應存放于充氮密閉容器內,內置變色硅膠指示劑監控濕度變化。相對濕度必須控制在30%以下以防止霉菌生長,必要時可投放分子篩干燥劑包增強吸濕效果。
  2. 避光防氧化措施
  包裝材料選用不透光鋁箔袋真空封裝,加入抗氧化劑(如維生素C粉末)。儲存柜應遠離窗戶擺放,避免紫外線加速材料老化。定期抽檢存放樣品的顏色變化情況作為質量預警指標。
  3. 周期性巡檢制度
  建立電子檔案管理系統記錄每個探針的使用次數、清洗歷史和性能參數。每月隨機抽取庫存中的10%進行外觀檢查和流量測試,確保隨時可用狀態。超過半年未使用的探針啟用前需重新校準。
 

 

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